近年來(lái),ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應用,ELISA試劑盒根據試劑的來(lái)源和標本的情況以及檢測的具體條件,又分為雙抗夾心法、間接法、競爭法等幾種類(lèi)型。
那么,這幾種類(lèi)型分別應用于哪些實(shí)驗?這些類(lèi)型的優(yōu)缺點(diǎn)又是什么呢?請繼續往下看!
雙抗體夾心法測抗原:雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,適用于測定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。
雙抗原夾心法測抗體:反應模式與雙抗體夾心法類(lèi)似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結合物,以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋?zhuān)芍苯佑糜跍y定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標抗原的制備,應根據抗原結構的不同,尋找合適的標記方法。
間接法:是檢測抗體常用的方法,本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。
競爭法測抗體:當抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合??笻Be的檢測一般采用此法。
競爭法測抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的酶標抗原愈少,最后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。